Hõ trợ trực tuyến
Nhất Đại Thánh Sư -Tư Vấn Luận Án Nhất Đại Thánh Sư -Tư Vấn Luận Án
024.62.97.0777
My status
Nhận hồ sơ Tuyển sinh CĐ-ĐH Y Dược-Sư Phạm Nhận hồ sơ Tuyển sinh CĐ-ĐH Y Dược-Sư Phạm
024.62.97.0777

Tất cả PDF Doc/Xml/Ppt/Text Prc Chm Lit Âm thanh Video
share Nghiên cứu đặc tính của chitinase tự nhiên và biểu hiện chitinase tái tổ hợp từ chủng nấm lecanicillium lecanii lên facebook cho bạn bè cùng đọc!
Nghiên cứu đặc tính của chitinase tự nhiên và biểu hiện chitinase tái tổ hợp từ chủng nấm lecanicillium lecanii

Ngày đăng: 02/01/2016 Lượt xem: 489 Người Upload: legiang
Yêu thích: 0 Báo xấu: 0 Loại file: pdf

Luận án tiến sĩ sinh học:Nghiên cứu đặc tính của chitinase tự nhiên và biểu hiện chitinase tái tổ hợp từ chủng nấm lecanicillium lecanii....Nấm Lecanicilliumcó khả năng kí sinh tự nhiên và giết chết nhiều loại côn trùng như rệp, ruồi trắng, bộ cánh đều,bộ cánh cứng, bộ cánh thẳng, bướm . Cơ chế diệt côn trùng của Lecanicillium dựa trên sự tiếp xúc trực tiếp của bào tử với côn trùng

LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC

 

NGHIÊN CỨU ĐẶC TÍNH CỦA CHITINASE TỰ NHIÊN VÀ BIỂU HIỆN CHITINASE TÁI TỔ HỢP TỪ CHỦNG NẤM LECANICILLIUM LECANII

 

Chuyên ngành: Hóa sinh học

 

NHDKH::PGS.TS. Quyền Đình Thi - PGS.TS. Nguyễn Vũ Thanh Thanh 

 

NCS: Nguyễn Hữu Quân

 

***********

 

 

MỞ ĐẦU

 

1. Đặt vấn đề

 

Trong những năm gần đây, các biện pháp sinh học như sử dụng nấm kí sinh hay các loài thiên địch trong việc phòng chống sâu hại cây trồng đang được quan tâm nghiên cứu. Các chế phẩm sinh học từ nấm ra đời đã được sử dụng để diệt trừ các loại sâu, nhện, bọ trĩ và bọ cánh phấn. Tuy nhiên, việc sử dụng biện pháp

 

vi nấm kí sinh đối với rệp là vấn đề đang còn mới mẻ trong nông nghiệp. Cùng với sự phát triển kinh tế -xã hội, con người ngày càng có nhu cầu sử dụng các sản phẩm rau quả sạch, hạn chế mức thấp nhất việc sử dụng thuốc trừ sâu hóa học dùng trong sản xuất rau, củ quả. Các loài thiên địch như nấm kí sinh côn trùng gây hại cây trồng đã được sử dụng, do chúng có khả năng phát tán rất nhanh và chỉ diệt các loài côn trùng có hại mà không ảnh hưởng tới nguồn nước, môi trường sinh thái và sức khỏe con người, vật nuôi.

 

Nấm kí sinh côn trùng thường tác động đến những loại mô nhất định như tuyến mỡ và các mô khác bị hòa tan là do các enzyme (chitinase, protease) của nấm. Trong quá trình tác động lên côn trùng, nấm tiết ra các enzyme càng mạnh thì tốc độ hủy hoại và tiêu diệt côn trùng gây bệnh càng nhanh, tiết kiệm được thờigian. Dựa vào đặc tính này của nấm, việc tạo ra một lượng lớn enzymeđặc biệt là chitinasebổ sung vào chế phẩm sinh học là rất cần thiết.

 

Chitinase là enzyme thuỷ phân chitin thành các đơn phân N-acetyl glucosamine, chitobiose hay chitotriose qua việc xúc tác sự thủy giải liên kết β-1,4-glucoside giữa C1và C4của 2 phân tử N-acetyl glucosamine liên tiếp nhau trong chitin. Chitinase có ứng dụng rộng rãi trong lĩnh vực nông nghiệp, y học.

 

Từ thực tế trên, việc nghiên cứu đặc tính chitinase và qui trình tạo ra chitinase cao góp phần làm tăng hiệu quả của chế phẩm bào tử nấm là rất cần thiết.

 

Chương1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU

 

1.1. Nấm Lecanicillium lecanii

 

Lecanicillium là chi nấm kí sinh côn trùng thuộc ngành nấm túi Ascomycota, lớp Sordariomycetes, bộ Hypocreales, họ Clavicipitaceae. Chi nấm Lecanicillium gồm nhiều loài như: Lecanicillium lecanii, L. attenuatum,L. longisporum, L. muscarium hoặc L. nodulosum. Nấm L. lecanii trước đây được gọi là Verticillium lecanii. Ngày nay, L. lecaniiđược biết là một hình thức sinh sản vô tính trong nhóm trùngthảo Cordyceps confragosa [124].

 

Nấm Lecanicilliumcó khả năng kí sinh tự nhiên và giết chết nhiều loại côn trùng như rệp, ruồi trắng, bộ cánh đều,bộ cánh cứng, bộ cánh thẳng, bướm . Cơ chế diệt côn trùng của Lecanicillium dựa trên sự tiếp xúc trực tiếp của bào tử với côn trùng. Sau khi bám vào cơ thể côn trùng, các bào tử nảy mầm và tạo thành sợi nấm đâm sâu vào các khoang trong cơ thể, tại đây chúng sinh trưởng và phá hủy mô. Sau đó, sợi nấm sẽ phát triển xuyên qua các lớp biểu bì của côn trùng. Trong điều kiện độ ẩm cao, bào tử được tạo thành bên ngoài cơ thể côn trùng và có thể lây truyền bệnh cho côn trùng khác [95].

 

Dựa vào đặc tính diệt côn trùng của nấm L. lecanii, các nghiên cứu hiện nay đi theo hai hướngchính là:đi sâu khai thác đặc điểm sinh học của chế phẩm bào tử nấm L. lecaniisử dụng trong kiểm soát côn trùng; và tìm hiểu vai trò của hệ enzyme (chitinase, protease, lipase) hoặc độc tố do nấm L. lecanii sinh ra trong quá trình diệt côn trùng.

 

Các nghiên cứu về chitinase từ nấm Lecanicillium đã được các tác giả nghiên cứu theo các hướng chính là

 

(i) tối ưu quá trình sinh tổng hợp chitinase;

 

(ii) tinh sạch và xác định khả năng thủy phân lớp vỏ trứng của côn trùng 

 

(iii) nhân dòng và biểu hiện gen mã hóa chitinase. Tuy nhiên, các kết quả nghiên cứu chỉ dừng lại ở từng khâu nghiên cứu riêng lẻ và hoạt tính chitinase sinh ra còn rất thấp. Mặt khác, chủng nấm L. lecanii nói riêng và các vi sinh vật nói chung thường hay xuất hiện các biến dị và quá trình sinh chitinase luôn thay đổi ở các 5 điều kiện môi trường, dẫn tới tính chất của chitinase sinh ra từ các chủng nấm là khác nhau. Do vậy, quá trình nghiên cứu đầy đủ về chitinase từ bước lựa chọn điều kiện môi trường thích hợp cho việc nâng cao khả năng tổng hợp chitinase đến tinh sạch và xác định các điều kiện ảnh hưởng tới hoạt tính enzyme; cũng như việc nhân dòng và biểu hiện gen mã hóa chitinase từ chủng nấm L. lecanii trong nấm men để nâng cao khả năng biểu hiện, sau đó thử nghiệm hoạt tính của chitinase và chế phẩm bào tử trong quá trình diệt rệp và nấm bệnh hại cây trồng là hướng nghiên cứu cần thiết để nâng cao hiệu quả của chế phẩm sinh học.

 

1.2. Chitinase

 

Chitinase là nhóm enzyme thủy phân có khả năng phân cắt liên kết β-1,4-glycoside giữa C1 và C4 của hai phân tử N-acetyl glucosamine liên tiếp nhau trong phân tửchitin, chitobiose và chitotriose. Chitinase được chia thành 2 loại chính là endochitinase (EC 3.2.1.14) và exochitinase. Exochitinase gồm chitobiosidase (EC 3.2.1.29) và N-acetyl glucosaminidase (EC 3.2.1.30). Mỗi loại enzyme tham gia vào thủy phân cơ chất theo một cơ chế nhất định và nhờ sự phối hợp hoạt động của các enzyme đó mà phân tử cơ chất được thủy phân hoàn toàn tạo các đơn phân N-acetyl glucosamine.

 

Cơ chất thủy phân của chitinase thường là chitin. Chitin là một polysacharide mạch thẳng không cuộn xoắn, có màu trắng, cứng và không đàn hồi được tạo nên từ các đơn phân N-acetyl glucosamine thông qua liên kết 1,4-βglycoside. Chitin là chất hữu cơ đứngthứ 2 trong tự nhiên sau cellulose.

 

Trong tự nhiên, chitin gồm 3 dạng cấu trúc là α, βvà γ-chitin. Trong đó, dạng α-chitin có cấu trúc đối song song gồm các chuỗi polysaccharide xếp xen kẽ nhau và là dạng phổ biến nhất trong tự nhiên. α-chitin là thành phần cấu tạo nên bộ xương ngoài của côn trùng, giáp xác, nhuyễn thể và vách tế bào của nấm.

 

Dạng β-chitin thường hiếm hơn, có cấu trúc song song gồm các chuỗi polysaccharide xếp xen kẽ nhau và tồn tại ở dạng liên kết với protein. Dạng γ-chitin được tạo nên từ 2 chuỗi song song xen kẽ với 1 chuỗi đối song song.

 

Dạng γ-chitin thường tồn tại ở các loài nấm [57]

 

Chitin nguyên bản thường có màu trắng đục, mềm dẻo, đàn hồi và khá dai nên khó bị thủy phân. Trong động vật chân đốt, chitin được sửa đổi và liên kết với protein giống như một ma trận và tạo thành bộ xương ngoài. Ở dạng tinh khiết chitin thường dai, nhưng khi tham gia vào thành phần cấu tạo ở hầu hết các động vật không xương chitin lại là nguyên liệu tổng hợp. Trong vỏ giáp xác và động vật thân mềm, chitin kết hợp với canxi cacbonat tạo thành hỗn hợp bền vững hơn. Sự kết hợp này giúp cho chitin cứng và đặc hơn so với dạng tinh khiết, đồng thời bền vững và ít giòn hơn so với canxi cacbonat [27].

 

1.2.1. Nguồn gốc của chitinase

 

Chitinase được tổng hợp từ rất nhiều nguồn sinh vật khác nhau trong tự nhiên như thực vật, động vật và vi sinh vật. Trong đó, vi sinh vật được xem là nguồn cung cấp chitinase nhiều hơn so với động vật và thực vật.

 

Chitinase được sinh ra từ vi sinh vật gồm 2 loại là endochitinase và exochitinase. Nấm mốc là một trong những nhóm vi sinh vật có khả năng sinh tổng hợp chitinase mạnh nhất. Các loài nấm mốc thuộc các chi như Trichoderma Glicocladium; Metharhizium [61], [128]; Beauveria, Lecanicillium; Aspergillus [145]; Penicillium [80] đã được nghiên cứu là có khả năng sinh tổng hợp chitinase mạnh. Bên cạnh đó, vi khuẩn cũng được xem là đối tượng có khả năng sinh chitinase khá phong phú. Chitinase được sinh ra từ vi khuẩn thuộc các chi như Serratia [148], Aeromonas [139], Arthrobacter [100],Micrococcus [19], Clostridium, Bacillus [24], [137] và đặc biệt là nhóm Streptomycetes Chitinase được tạo ra từ vi sinh vật có vai trò phân giải chitin trong tự nhiên.

 

Thành tế bào của nấm sợi và nấm men được tạo nên từ các phân tử chitin và các hợp chất khác (manan, glucan, cellulose). Tuy nhiên, cấu trúc chitin này so với chitin trong tự nhiên có sự khác nhau về tính không tan, kích thước, độ nhớt, độ phức tạp phân tử và tính không đồng nhất nên không bị thủy phân bởi chitinase của cơ thể. Ở thực vật, chitinase có mặt chủ yếu trong thân, củ, hạt và hoa của các loài như khoai tây, thuốc lá, đậu, cà chua, ngô, khoai lang và đậu Hà Lan.

 

Chitinase được sinh ra trong giai đoạn phát triển sớm của cơ thể có vai trò tham gia vào quá trình hình thành và phát triển phôi. Chitinase trong cây được sinh ra khi có sự kích thích của mầm bệnh giúp cây chống lại sự tấn công của các nấm kí sinh gây bệnh. Ở thực vật, chitinase chủ yếu thuộc loại endochitinase và có kích thước nhỏ hơn so với các nhóm khác.

---------------------------------------------------------------------------------------------------------

                             

MỤCLỤC

 

MỞ ĐẦU

1. Đặt vấn đề

2. Mục tiêu nghiên cứu

3. Nội dung nghiên cứu

4. Những đóng góp mới của luận án

5.Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài luận án

Chương 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU

1.1. Nấm Lecanicillium lecanii

1.2. Chitinase

1.2.1. Nguồn gốc của chitinase

1.2.2. Phân loại chitinase

1.2.3. Cấu trúc và trung tâm hoạt động của chitinase

1.2.4. Cơ chế phản ứng của chitinase

1.2.5. Các yếu tố ảnh hưởng tới hoạt tính của chitinase

1.2.6. Các yếu tố ảnh hưởng tới quá trình sinh tổng hợp chitinaseiv

1.3.Ứng dụng của nấm L. lecaniivà chitinase

1.3.1. Trong lĩnh vựcnông nghiệp và bảo vệ môi trường

1.3.2. Tronglĩnh vực y học

1.3.3. Trong lĩnh vực côngnghệ sinh học

1.4. Một số nghiên cứu về gen và biểu hiện gen mã hóa chitinase

1.4.1. Trên thế giới

1.4.2.Ở Việt Nam

Chương 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP

2.1. Vật liệu và hóa chất

2.1.1. Chủng giống

2.1.2. Thiếtbị

2.1.3. Hóa chất

2.1.4. Dung dịch và đệm

2.1.5. Môi trường nuôi cấy

2.2. Phương phápnghiên cứu

2.2.1. Phương pháp nuôi cấy

2.2.2. Phương pháp hóa sinh

2.2.3. Tinh sạch chitinase

2.2.4. Nghiên cứu ảnhhưởng của một số yếu tố lý hóa lên hoạt tính và độ bền của chitinase tự nhiên và tái tổ hợp

2.2.5. Các phương pháp sinh học phân tử

2.2.6. Phương pháp thử nghiệm

2.2.7. Xử lý số liệu

Chương 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN

3.1. Sàng lọc, kiểm tra và khảo sát điều kiện sinh tổng hợp chitinasetừ nấm L. lecanii

3.1.1. Sàng lọcchủng nấm L. lecaniisinh tổng hợp chitinase cao

3.1.2. Kiểm trachủng nấm L. lecanii43H dựa vào đoạn gen 28S rRNA

3.1.3. Khảo sát điều kiệnsinh tổng hợp chitinase

3.2. Tinh sạch và đánh giá tính chất lý hóa của chitinase từ chủngnấm L. Lecanii43H

3.2.1. Tinh sạch chitinase

3.2.2. Đánh giá tính chất lý hóa của chitinase từ chủng nấm L. lecanii 43H

3.3. Nhân dòng gen mã hóa chitinase từ chủng nấm L. lecanii43H

3.4. Biểu hiện, tinh sạch và đánh giá tính chất lý hóa của rChit trongnấm men P. pastorisX

3.4.1. Thiết kế plasmid pPChit biểu hiện gen Chittrong nấm men

3.4.2. Biểu hiện chitinase tái tổ hợp trong nấm men P. pastoris

3.4.3. Tinh sạch rChit

3.4.4. Đánh giá tính chất lý hóa của rChittừ nấm men P. pastoris X

3.5. Thử nghiệm khả năng ức chế rệp và nấm bệnh của chitinase vàbào tử từ nấm L. lecanii

3.5.1.Ảnh hưởng của chitinase tới sự phát triển của nấm bệnh hại câytrồng

3.5.2.Ảnh hưởng của rChit tới khả năng phát triển của rệpvi

3.5.3.Ảnh hưởng của nhiệt độ đến khả năng phát triển của sợi nấm

3.5.4.Ảnh hưởng của nhiệt độ đến khả năng nẩy mầm của bào tửnấm

3.5.5. Khả năng diệt rệp của chủng nấm L. lecanii43H

KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

1. KẾT LUẬN

2. KIẾN NGHỊ

-----------------------------------------------------------------------------

TÀI LIỆU THAM KHẢO

 

TIẾNG VIỆT

 

1. Bùi Thị Lan Hương, Nguyễn Thị Trường, Vũ Duy Thanh, Nguyễn Thị Kim Lý, Nguyễn Đức Doanh, Phan Tố Phượng, Nguyễn Hồng Minh, Lê Thị Ánh Hồng (2009), "Nghiên cứu chuyển gen Chitinase-Glucanase kháng nấm vào cây cà chua thông qua vi khuẩn Agrobacterium tumerfaciens", Tạp chí Khoa học và Công nghệ Nông nghiệp Việt Nam, 1, tr. 2-7.

2. Cao Cường, Nguyễn Đức Lượng (2003), "Khảo sát quá trình cảm ứng enzym chitinaza và celluloza của Trichoderma harzianum-Ảnh hưởng của hai enzym này lên nấm bệnh Sclerotium rolfsii", Kỷ yếu Hội nghị Công nghệ Sinh học toàn quốc 2003, Nxb Khoa học và kỹ thuật, tr. 321-324.

3. Đặng Trọng Lương, Kiều Thị Dung, Nguyễn Thúy Điệp, Phí Công Nguyên, Đặng Thị Minh Trang, Nguyễn Trường Khoa (2005), "Nghiên cứu chuyển gen chitinase kháng nấm vào cây lúa thông qua vi khuẩn Agrobacterium tumefaceins", Báo cáo khoa học, hội nghị toàn quốc, Nxb Khoa học và kỹ thuật, tr. 1295-1297.

4. Đinh Duy Kháng, Nông Văn Hải, Trương Nam Hải, Chikafusa Fukazawa (1999), "Tinh chế và xác định tính chất của chitinase từ đậu tương", Kỷ yếu Hội nghị Công nghệ Sinh học toàn quốc, Nxb Khoa học Tự nhiên Hà Nội, tr. 585-591.

5. Đinh Minh Hiệp, Lê Đình Đôn, Nguyễn Tiến Thắng, Ngô Kế Sương (2007), "Khảo sát hoạt tính các enzym chitinase, β-glucanse, cellulase, pectinase, amylase, protease của các chủng Trichodermaphân lập tại Việt Nam", Báo cáo khoa học, hội nghị toàn quốc, Nxb Khoa học và kỹ thuật, tr. 100-105.

6. Đinh Minh Hiệp, Phạm Nguyễn Thanh Thảo, Nguyễn Văn Thanh, Nguyễn Tiến Thắng, Ngô Kế Sương (2008), "Thu nhận chitinase từ chủng TrichodermaTĐ14 và khảo sát khả năng kháng vi nấm Candida albicans", 95 Kỷ yếu Hội nghị khoa học toàn quốc lần thứ IV Hóa sinh và Sinh học phân tử phục vụ Nông, Sinh, Y học và Công nghệ thực phẩm, Nxb Khoa học và kỹ thuật, tr. 48-51.

7. Hà Hồng Hạnh, Lê Thanh Hương, Lê Thị Thu Hiền (2013), "Phân lập gen mã hóa chitinase và thiết kế các vector biểu hiện thực vật", Kỷ yếu Hội nghị Công nghệ Sinh học toàn quốc, Nxb Khoa học tự nhiên và Công nghệ, tr. 82-86.

8. Nguyễn Ngọc Mai, Vũ Văn Hạnh (2013), "Nâng cao khả năng sản xuất chitinase của chủng nấm ký sinh côn trùng bằng kỹ thuật đột biến", Kỷ yếu Hội nghị Công nghệ Sinh học toàn quốc, Nxb Khoa học tự nhiên và Công nghệ, tr. 364-368.

9. Nguyễn Thị Hồng Minh, Nguyễn Ngọc Mai, Vũ Văn Hạnh (2013), "Tối ưu môi trường lên men xốp sản xuất cao sản chitinase từ chủng nấm kí sinh côn trùng Lecanicillium đột biến", Kỷ yếu Hội nghị Công nghệ Sinh học toàn quốc, Nxb Khoa học tự nhiên và Công nghệ, tr. 379-383.

10. Nguyễn Thị Tuyết Nhung, Nguyễn Minh Anh, Nguyễn Ngọc Dũng (2004), "Nghiên cứu khả năng sinh tổng hợp chitinase của các chủng vi khuẩn đối kháng vi nấm", Báo cáo khoa học, hội nghị toàn quốc, Nxb Khoa học và kỹ thuật, tr. 125-128.

11. Quách Ngọc Tùng, Nguyễn Văn Hiếu, Nguyễn Phương Nhuệ, Phí Quyết Tiến (2012), "Nâng cao sinh tổng hợp chitinase của chủng Bacillus licheniformis DS23 bằng phương pháp quy hoạch thực nghiệm", Tạp chí Khoa học và Công nghệ-VAST, 50, tr. 625-632.

12. Trần Đình Toại, Nguyễn Văn Thiết, Nguyễn Bích Thủy, Đỗ Trung Sỹ (2008), "Động học của quá trình hoạt hóa chitinase trong phản ứng thủy phân chitin thành glucosamine", Tạp chí Khoa học và Công nghệ-VAST, 46, tr. 79-85. 96

13. Vũ Thị Thanh, Vũ Văn Hạnh, Nghiêm Ngọc Minh, Quyền Đình Thi (2013), "Tối ưu hóa các điều kiện môi trường ảnh hưởng đến khả năng sinh tổng hợp chitinase của chủng nấm Penicillium sp.M4 phân lập từ ruộng mía", Kỷ yếu Hội nghị Công nghệ Sinh học toàn quốc 2013, Nxb Khoa học tự nhiên và Công nghệ, 1, tr. 484-488.

 

TIẾNG ANH

 

14. Abbott W. S. (1925), "A method of computing the effectiveness of an insecticide", J. Econ. Entomol., 18, pp. 265-267.

15. Abd Elhamid M. I., Makboul H. E., Sedik M. Z., Ismail I. M., Ibrahim M. A. (2010), "Cloning, expression and antifungal activity of an endochitinase gene derived from Barley (Hordeum Vulgare)", Res. J. Agric. Biol. Sci., 6, pp. 356-363.

16. Al-Rashed S. A. A., Bakar F. D. A., Said M., Hassan O., Rabu A., Illias R. M., Murad A. M. A. (2010), "Expression and characterization of the recombinant Trichoderma virens endochitinase Cht2", Afr. J. Microbiol. Res., 4, pp. 1758-1767.

17. Altre J. A., Vandenberg J. D. (2001), "Factors influencing the infectivity of isolates of Paecilomyces fumosoreus against diamondback moth, Plutella xylostella", J. Invertebr. Pathol., 78, pp. 31-36.

18. Altre J. A., Vandenberg J. D., Cantone F. A. (1999), "Pathogenicity of Paecilomyces fumosoreus isolates to diamondback moth, Plutella xylostella: correlation with spore size, germintation speed, and attachment to cuticle", J. Invertebr. Pathol., 73, pp. 332-338.

19. Annamalai N., Giji S., Arumugam M., Balasubramanian T. (2010), "Purification and characterization of chitinase from Micrococcus sp. AG84 isolated from marine environment", Afr. J. Microbiol. Res., 4, pp. 2822-2827. 97

20. Anuradha V., Revathi K. (2013), "Purification and characterization of chitinase fromtwo Bacillus sp isolated from crustacean shells", J. Microbiol. Biotech. Res., 3, pp. 160-167.

21. Balasubramanian N., Juliet A. A., Srikalavani P., Lalithakumari D. (2003), "Release and regeneration of protoplasts from Trichothecium roseum", Can. J. Microbiol., 49, pp. 263-268.

22. Barboza-Corona J. E., Nieto-Mazzocco E., Velázquez-Robledo R., Salcedo-Hernandez R., Bautista M., Jiménez B., Ibarra J. E. (2003), "Cloning, sequencing, and expression of the chitinase gene chiA74 from Bacillus thuringiensis", Appl. Environ. Microbiol., 69, pp. 1023-1029.

23. Barghini P., Moscatelli D., Garzillo A. M. V., Crognale S., Fenice M. (2013), "High production of cold-tolerant chitinases on shrimp wastes in bench-top bioreactor by the Antarctic fungus Lecanicillium muscarium CCFEE 5003: Bioprocess optimization and characterization of two main enzymes", Enzyme Microb. Technol., 53, pp. 331-338.

24. Bhushan B., Hoondal G. S. (1998), "Isolation, purification and properties of a thermostable chitinase from an alkalophilic Bacillus sp. BG-11", Biotechnol Lett, 20, pp. 157–159.

25. Brzezinska M. S., Jankiewicz U. (2012), "Production of antifungal chitinase by Aspergillus niger LOCK 62 and its potential role in the biological control", Curr. Microbiol., 65, pp. 666-72.

26. Caihong H., Qian Y., Jinzhu S., Yingqi S. (2007), "Expression of a novel chitinase gene from Trichoderma harzianumin Saccharomyces cerevisiae", Proceedings of the 1 st International Conference on Bioinformatics and Biomedical Engineering held at Wuhan, China 1, pp. 283-285.

27. Campbell N. A. (1996), "Biology (4th edition) Benjamin Cummings", New Work ISBN 0-8053-1957-3, 69, pp. 

 

 

Keyword:download,luan an tien si sinh hoc,nghien cuu dac tinh,cua chitinase tu nhienva,bieu hien chitinase tai to hop tu,chung nam lecanicillium lecanii,chuyen nganh hoa sinh hoc,nguyen huu quan

 

 

 

TT Tên file Ấn hành Tác giả Thông số Tải về Xem-Nghe Giá Down
1 Nghiên cứu đặc tính của chitinase tự nhiên và biểu hiện chitinase tái tổ hợp từ chủng nấm lecanicillium lecanii đại học... Nguyễn hữu quân 128tr Download file Nghiên cứu đặc tính của chitinase tự nhiên và biểu hiện chitinase tái tổ hợp từ chủng nấm lecanicillium lecanii 1200
  • nghiên cứu khả năng kháng rầy nâu và đặc điểm nông sinh học của một số giống lúa tại thừa thiên huế

  • tinh sạch và nghiên cứu đặc tính của cellulase tự nhiên và tạo cellulase tái tổ hợp từ nấm sợi tại việt nam

  • Nghiên cứu cải tiến quy trình đông lạnh tế bào trứng bò nhằm nâng cao hiệu quả tạo phôi trong ống nghiệm

  • Nghiên cứu biến tính vật liệu pbo2 ứng dụng làm sen sơ điện hóa

  • Nghiên cứu thành phần hóa học và khảo sát hoạt tính sinh học của loài xáo leo

  • Nghiên cứu tổng hợp một số vinyl polyme ứng dụng làm tá dược

  • Phân lập, tuyển chọn và ứng dụng vi khuẩn đông tụ để xử lý nước thải chăn nuôi heo

  • Nghiên cứu tổng hợp và khảo sát tính chất hấp phụ hoạt tính xúc tác quang của vật liệu mil-101 cr

  • Nghiên cứu tính chất hóa lý và hình thái cấu trúc của vật liệu tổ hợp pe/eva/tro bay biến tính hữu cơ

  • Nghiên cứu phân tích thành phần cấu trúc hóa học của fucoidan có hoạt tính sinh học từ một số loài rong nâu ở vịnh nha trang

  • Khu vực quy định Bản quyền tài liệu và chất lượng tài liệu Khu vực quy định Hướng dẫn download tài liệu trên trang AMBN

    Tìm bài thi Hỏi đáp Liên Hệ Tài liệu trên internet Tin giáo dục Quy định sử dụng

    Nghiên cứu đặc tính của chitinase tự nhiên và biểu hiện chitinase tái tổ hợp từ chủng nấm lecanicillium lecanii

    Nghiên cứu đặc tính của chitinase tự nhiên và biểu hiện chitinase tái tổ hợp từ chủng nấm lecanicillium lecanii

    Hướng dẫn download tài liệu trên trang AMBN

    Đăng nhập tài khoản
    Các mục quảng cáo
    Thống kê truy cập
    Đang Online: 542
    Hôm nay:45529
    Hôm qua: 57145
    Trong tháng 1187501
    Tháng trước1846949
    Số lượt truy cập: 110348562